我國(guó)顯微鏡行業(yè)發(fā)展的越來越快，根據(jù)應(yīng)用領(lǐng)域和產(chǎn)品特點(diǎn)，越來越多的高精度顯微鏡開始被創(chuàng)造出來。例如今天小編要帶大家了解的，熒光顯微鏡。它是顯微鏡行業(yè)中重要的產(chǎn)品之一，那么它的結(jié)構(gòu)部件特點(diǎn)是怎樣的呢？
（一）光源
使用于落射熒光顯微鏡觀察的照明器采用新型LED作為光源，提供高品質(zhì)、穩(wěn)定性的熒光照明，遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)的汞燈照明。此外，多波段LED光源可選，并可控制每一個(gè)LED的亮度，可以實(shí)現(xiàn)多波長(zhǎng)的選擇激發(fā)，便捷、高效。
*特定的LED光源發(fā)射特定波長(zhǎng)的激發(fā)光，能夠更有效的激發(fā)樣品。
*超長(zhǎng)的使用壽命（50,000小時(shí)），極大地延長(zhǎng)了顯微鏡壽命、降低實(shí)驗(yàn)成本。
*實(shí)時(shí)開關(guān)，不需要預(yù)熱、冷卻。
*LED安全性高、冷光源、體積小，可隨意搬動(dòng)，不存在汞泄露污染、發(fā)燙問題。
*低功耗、可選配便攜式移動(dòng)電源，避免突然斷電的影響，便于野外考察使用。
*可匹配不同品牌不同類型的顯微鏡，無需光路調(diào)節(jié)。
（二）濾色系統(tǒng)
濾色系統(tǒng)是熒光顯微鏡的重要部位，由激發(fā)濾板和壓制濾板組成。濾板型號(hào)，各廠家名稱常不統(tǒng)一。濾板一般都以基本色調(diào)命名，前面字母代表色調(diào)，后面字母代表玻璃，數(shù)字代表型號(hào)特點(diǎn)。如德國(guó)產(chǎn)品（Schott）BG12，就是種藍(lán)色玻璃，B是藍(lán)色的第一個(gè)字母，G是玻璃的第一個(gè)字母；我國(guó)產(chǎn)品的名稱已統(tǒng)一用拼音字母表示，如相當(dāng)于BG12的藍(lán)色濾板名為QB24，Q是青色（藍(lán)色）拼音的第一個(gè)字母，B是玻璃拼音的第一個(gè)字母。不過有的濾板也可以透光分界濾長(zhǎng)命名，如K530，就是表示壓制濾長(zhǎng)530nm以下的光而透過530nm以上的光。還有的廠家的濾板完全以數(shù)字命名，如美國(guó)Corning廠的NO：5-58，即相當(dāng)于BG12。
1．激發(fā)濾板
根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn)，可選用以下3類激發(fā)濾板，提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光：
紫外光激發(fā)濾板：此濾板可使400nm以下的紫外光透過，阻擋400nm以上的可見光通過。常用型號(hào)為UG-1或UG-5，外加一塊BG-38，以除去紅色尾波。
紫外藍(lán)光激發(fā)濾板：此濾板可使300～450nm范圍內(nèi)的光通過。常用型號(hào)為ZB-2或ZB-3，外加BG-38。
紫藍(lán)光激發(fā)濾板：它可使350～490nm的光通過。常用型號(hào)為QB24（BG12）。
最大吸收峰在500nm以上者的熒光素（如羅達(dá)明色素）可用藍(lán)綠濾板（如B-7）激發(fā)。
近年開始采用金屬膜干涉濾板，由于針對(duì)性強(qiáng)，波長(zhǎng)適當(dāng)，因而激發(fā)效果比較玻璃濾更好。如西德Leitz廠的FITC專用KP490濾板和羅達(dá)明的S546綠色濾板，均遠(yuǎn)比玻璃濾板效果好。
激發(fā)濾板分薄厚兩種，一般暗視野選用薄濾板，亮視野熒光顯微鏡可選用厚一些。基本要求是以獲得最明亮的熒光和最好的背景為準(zhǔn)。
2．壓制濾板
壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過，提供相應(yīng)濾長(zhǎng)范圍的熒光。與激發(fā)濾板相對(duì)應(yīng)，常用以下3種壓制濾板：
紫外光壓制濾板：可通過可見光、阻擋紫外光通過。能與UG-1或UG-5組合。常用GG-3K430或GG-6K460。
紫藍(lán)光壓制濾板：能通過510nm以上濾長(zhǎng)的熒光（綠到紅），能與BG-12組合。通常用OG-4K510或OG-1K530。
紫外紫光壓制濾板：能通過460nm以上波長(zhǎng)的熒光（藍(lán)到紅），可與BG-3組合，常用OG-11K470AK490，K510。
（三）反光鏡
反光鏡的反光層一般是鍍鋁的，因?yàn)殇X對(duì)紫外光和可見光的藍(lán)紫區(qū)吸收少，反射達(dá)90%以上，而銀的反射只有70%；一般使用平面反光鏡。
（四）聚光鏡
專為熒光顯微鏡設(shè)計(jì)制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成。分明視野聚光器的暗視野聚光器兩種。還有相差熒光聚光器。
1．明視野聚光器在一般熒光顯微鏡上多用明視野聚光器，它具有聚光力強(qiáng)，使用方便，特別適于低、中倍放大的標(biāo)本觀察。
2．暗視野聚光器暗視野聚光器在熒光顯微鏡中的應(yīng)用日益廣泛。因?yàn)榧ぐl(fā)光不直接進(jìn)入物鏡，因而除散射光外，激發(fā)光也不進(jìn)入目鏡，可以使用薄的激發(fā)濾板，增強(qiáng)激發(fā)光的強(qiáng)度，壓制濾板也可以很薄，因紫外光激發(fā)時(shí)，可用無色濾板（不透過紫外）而仍然產(chǎn)生黑暗的背景。從而增強(qiáng)了熒光圖像的亮度和反襯度，提高了圖像的質(zhì)量，觀察舒適，可能發(fā)現(xiàn)亮視野難以分辨的細(xì)微熒光顆粒。
3．相差熒光聚光器相差聚光器與相差物鏡配合使用，可同時(shí)進(jìn)行相差和熒光聯(lián)合觀察，既能看到熒光圖像，又能看到相差圖像，有助于熒光的定位準(zhǔn)確。一般熒光觀察很少需要這種聚光器。
（五）物鏡
各種物鏡均可應(yīng)用，但最好用消色差的物鏡，因其自體熒光極微且透光性能（波長(zhǎng)范圍）適合于熒光。由于圖像在顯微鏡視野中的熒光亮度與物鏡鏡口率的平方成正比，而與其放大倍數(shù)成反比，所以為了提高熒光圖像的亮度，應(yīng)使用鏡口率大的物鏡。尤其在高倍放大時(shí)其影響非常明顯。因此對(duì)熒光不夠強(qiáng)的標(biāo)本，應(yīng)使用鏡口率大的物鏡，配合以盡可能低的目鏡（4×，5×，6.3×等）。
（六）目鏡
在熒光顯微鏡中多用低倍目鏡，如5×和6.3×。過去多用單筒目鏡，因?yàn)槠淞炼缺入p筒目鏡高一倍以上，但目前研究型熒光顯微鏡多用雙筒目鏡，觀察很方便。
（七）落射光裝置
新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后，波長(zhǎng)短的部分（紫外和紫藍(lán)）由于濾鏡上鍍膜的性質(zhì)而反射，當(dāng)濾鏡對(duì)向光源呈45。傾斜時(shí)，則垂直射向物鏡，經(jīng)物鏡射向標(biāo)本，使標(biāo)本受到激發(fā)，這時(shí)物鏡直接起聚光器的作用。同時(shí)，濾長(zhǎng)長(zhǎng)的部分（綠、黃、紅等），對(duì)濾鏡是可透的，因此，不向物鏡方向反射，濾鏡起了激發(fā)濾板作用，由于標(biāo)本的熒光處在可見光長(zhǎng)波區(qū)，可透過濾鏡而到達(dá)目鏡觀察，熒光圖像的亮度隨著放大倍數(shù)增大而提高，在高放大時(shí)比透射光源強(qiáng)。它除具有透射式光源的功能外，更適用于不透明及半透明標(biāo)本，如厚片、濾膜、菌落、組織培養(yǎng)標(biāo)本等的直接觀察。近年研制的新型熒光顯微鏡多采用落射光裝置，稱之為落射熒光顯微鏡。
本文學(xué)由上海光學(xué)儀器廠原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載時(shí)請(qǐng)注明上海光學(xué)儀器廠網(wǎng)址：http://www.jsyx158.net/ |
