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值得了解的熒光顯微鏡操作方法

 我們可能介紹金相顯微鏡,視頻顯微鏡等種類較多,比如說它們的特征,操作方法,以及保養(yǎng)方法等等。有朋友就問,可不可以介紹下熒光顯微鏡的操作方法,以及如何使用時的一些注意要點呢?今天小編就來帶大家了解一下:

熒光顯微鏡使用方法和操作規(guī)程  
1.用窗簾遮蔽光線,關(guān)閉房間內(nèi)的燈光,除去顯微鏡的防塵罩,確保顯微鏡燈室通風(fēng)良好、無遮蓋。裝上汞燈燈箱,并轉(zhuǎn)動燈箱卡圈上的撥桿,將燈箱與鏡臂連接。  
2.將汞燈燈箱的電源插頭插入熒光電源箱后的插座,再將熒光電源箱的插頭插入220V外接電源。  
3.打開電源開關(guān),電壓表顯示出電源電壓,如電源電壓波動不大于額定電壓值的±5%,即可按下啟動開關(guān)點燃汞燈,如因天氣太冷或電壓不穩(wěn)定等原因,一次啟動未點燃汞燈,可以多撳動幾次。待超高壓汞燈弧光達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)并達(dá)到最大發(fā)光效率,即可開始工作。  
4.燈泡的調(diào)中:  
(1)任選一塊標(biāo)本放在載物臺上;  
(2)轉(zhuǎn)動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路,轉(zhuǎn)動濾色片組轉(zhuǎn)換手輪,將紫光(V)或藍(lán)光(B)或綠光(G)激發(fā)濾色片組轉(zhuǎn)入光路,并將10X熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路;  
(3)調(diào)節(jié)粗微調(diào)手輪,將標(biāo)本像調(diào)焦清晰;  
(4)前后推動垂直照明器右邊的聚光鏡調(diào)焦推桿,使視場光欄成像清晰,轉(zhuǎn)動視場光欄撥桿將視場光欄收小,調(diào)節(jié)視場光欄調(diào)中螺釘使視場光欄居中,然后再將視場光欄開至最大;  
(5)轉(zhuǎn)動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路,前后調(diào)節(jié)燈箱上的聚光鏡撥桿,使汞燈的弧光在視場內(nèi)成像清晰;  
(6)調(diào)整燈箱上的燈泡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘,使汞燈的弧光居中;  
(7)調(diào)整反光鏡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘,使光源的反射像與汞燈的弧光分開;  
(8)轉(zhuǎn)動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路,此時視場照明均勻。  
5.熒光觀察:  
(1)將熒光染色標(biāo)本放到載物臺上。  
(2)將10X平場物鏡或40X熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路,調(diào)節(jié)載物臺縱橫移動手輪,將標(biāo)本移入光路。  
(3)轉(zhuǎn)動濾光片轉(zhuǎn)換撥輪,將熒光染色標(biāo)本所需要的激發(fā)濾光片組轉(zhuǎn)入光路。激發(fā)濾光片組編號刻在濾片組轉(zhuǎn)換撥輪上。濾光片選擇正確與否,是熒光顯微鏡能否得到正確應(yīng)用的關(guān)鍵。選用濾光片時,必須遵守斯托克斯定律:激發(fā)濾光片的透射波長<雙色束分離器的透射波長<阻斷濾光片的透射波長。  
由于激發(fā)濾光片、雙色束分離器和阻斷濾光片,出廠時已按其用途和本身的光學(xué)特性進(jìn)行了嚴(yán)格的組合匹配,在觀察和攝影時,只需選擇濾光片組即可。  
(4)調(diào)節(jié)粗調(diào)手輪,當(dāng)看清熒光圖像輪廓后,再用微調(diào)手輪調(diào)焦,直至看到清晰的熒光圖像。  
(5)當(dāng)需要得到較強(qiáng)的熒光圖像時,可轉(zhuǎn)動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移入光路,可獲得較明亮的熒光圖像。  
(6)當(dāng)需要使用40X或100X熒光物鏡觀察時,應(yīng)在標(biāo)本和物鏡間加上甘油,油中不能有影響觀察的小泡或雜質(zhì)。使用時可使甘油慢慢浸潤一會兒,然后輕輕左右來回轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器以排除氣泡。  
6.熒光顯微攝影——顯微鏡攝像頭  
由于熒光圖像一般均較明場觀察暗得多,所以進(jìn)行熒光顯微攝影需要較長的曝光時間,在曝光時應(yīng)注意避免儀器震動。  
熒光顯微鏡攝影技術(shù)對于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易褪色減弱,要即時攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。
 

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